Real-time pcr là gì? Các công bố khoa học về Real-time pcr

Real-time PCR (Polymerase Chain Reaction) là một kỹ thuật trong di truyền phân tử để mở rộng một vài mẫu DNA hoặc RNA thành các bản sao nhiều lần để phân tích và phát hiện sự hiện diện của một chất di truyền cụ thể. Kỹ thuật này hoạt động bằng cách sử dụng các hợp chất quang học hoặc quang học để ngừng lại (stop) quá trình PCR để đo lường quá trình mở rộng DNA trong thời gian thực. Điều này cho phép người sử dụng quan sát quá trình diễn ra và đo lường lượng chất di truyền cụ thể có mặt trong mẫu. Real-time PCR được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học, y học và kiểm tra di truyền.
Real-time PCR, còn được gọi là qPCR (Quantitative PCR), là một phương pháp quan trọng trong di truyền phân tử để phát hiện và đo lường lượng chất di truyền cụ thể trong một mẫu. Nó mang đến sự cải tiến so với PCR thông thường bằng cách cung cấp thông tin về số lượng chất di truyền có mặt trong một mẫu sử dụng trong suốt quá trình PCR.

Quá trình Real-time PCR được thực hiện bằng cách sử dụng một bộ phận quang học được gắn với thiết bị PCR để đo lường liên tục sự gia tăng của sản phẩm PCR trong thời gian thực. Điều này giúp người sử dụng quan sát và đánh giá độ tăng của DNA trong quá trình PCR.

Có hai phương pháp chính để theo dõi và đo lường sự gia tăng DNA trong Real-time PCR:

1. Dye-based detection: Loại phổ biến nhất của phương pháp này là sử dụng các chất fluorescent dựa trên Sybr Green hoặc EvaGreen. Các chất này có khả năng đóng kín với DNA khi nó được sao chép trong quá trình PCR. Khi chất dừng lại liên kết với DNA, chúng phát ra tín hiệu fluorescent. Mức độ phát quang của tín hiệu này tương ứng với lượng DNA đã được sao chép. Điều này cho phép người sử dụng xác định số lượng chất di truyền có mặt trong mẫu ban đầu.

2. Probe-based detection: Phương pháp này sử dụng các đầu dò tương tác với một vùng mục tiêu cụ thể trên DNA hoặc RNA trong quá trình PCR. Đầu dò trong phương pháp này bao gồm fluorophore (dye truyền tín hiệu) và quencher (chất khử tín hiệu). Khi đầu dò tương tác với vùng mục tiêu, chúng bị tách ra và phát quang. Sự phát quang này phụ thuộc vào lượng chất di truyền mà đầu dò phát hiện đã kết hợp với. Thông qua đo lường tín hiệu phát quang, người sử dụng có thể xác định số lượng chất di truyền trong mẫu.

Real-time PCR có nhiều ứng dụng trong nghiên cứu sinh học và y học, bao gồm chuẩn đoán các bệnh di truyền, kiểm tra vi khuẩn và virus, xác định sự hiện diện của gen cụ thể, theo dõi biểu hiện gen và đo lường lượng gen trong mẫu nghiên cứu.